D-二聚體排除試驗試劑盒（酶聯免疫熒光法）說明書

【產品名稱】 通用名稱：D-二聚體排除試驗試劑盒（酶聯免疫熒光法） 英文名稱：VIDAS D-Dimer Exclusion II (DEX2)

【包裝規格】 60 測試/盒

【預期用途】 本產品用于體外定量檢測人血漿（含枸櫞酸鹽）中的纖維蛋白降解產物（FbDP）。 D-二聚體排除試驗試劑盒（酶聯免疫熒光法）是一種在 VIDAS 系列分析儀上使用的自動定量試驗，使 用 ELFA 技術（酶聯免疫熒光分析）。 VIDAS D-二聚體排除試驗 II 與臨床可能性評分診斷模型相結合，用于排除可疑患有 DVT（深靜脈血栓） 或 PE（肺栓塞）的門診病人是否患有這兩種疾病。纖維蛋白降解產物（FbDP）是一些高度異質性的可溶性 片段， 在兩個同步進行的生理反應發生時出現在循環系統中（1）。 凝固，可溶性纖維蛋白原在凝血酶及因子 XIIIa 作用下凝固成不溶性的穩定的纖維蛋白。 纖維蛋白溶解，纖溶酶使纖維蛋白凝塊溶解。 D -二聚體片段是這個過程的最終產物（2）。 雖然 FbDP 的大小各不相同，但他們都具有一個或多個 D -二聚體抗原決定簇（1，2）。因此，將 FbDP 統稱為“D -二聚體"。由于單克隆抗體能夠特異性識別纖維蛋白抗原表位，因此 D -二聚體試驗可以直接檢 測血漿中的 D -二聚體，而與纖維蛋白原及其降解產物來無交叉反應（1）。 D -二聚體反映穩定的纖維蛋白的存在，使得此標志物成為靜脈血栓栓塞（VTE）的診斷的有用工具（3）。 基于 ELISA 技術的 D -二聚體定量檢測在反應阻斷血栓的存在方面靈敏度很高，因此，在排除靜脈血栓栓塞 性疾病方面十分有價值（4，5）。 結合臨床可能性評分診斷評估，當 D -二聚體濃度低于預定的臨界值（由嚴格的臨床研究決定）時， 它可以在可疑門診病人中安全地排除深靜脈血栓癥（DVT）和肺栓塞（PE）的診斷（5-7）。D -二聚體 ELISA 檢測在可疑 DVT 或 PE 患者診斷工作中的臨床實用性在于可以顯著減少影像學檢測的次數，同時會使診斷 總成本相應減少（8，9）。D -二聚體并非特異性的存在于 DVT / PE 中，在凝血和纖溶激活時的其他各種條 件（如手術，外傷，感染，炎癥，妊娠，）下也可觀察到其水平升高（3）。因此，由于住院患者伴有可升 高 D -二聚體水平的合并癥比例很大，在使用 D -二聚體排除 DVT 或 PE 時，其應用性較低（5,10）。某些情 況導致 D -二聚體結果可能會低于預期而出現假陰性。因此，當可疑 DVT / PE 患者的臨床可能性評估預發 生概率較高、DVT/PE 的癥狀持續時間較長（超過一個星期）或已在進行抗凝治療時，使用 D -二聚體排除 DVT/PE 并不安全（10，11）。 D -二聚體測定也可用來輔助診斷彌漫性血管內凝血（DIC）（12）。

【檢驗原理】 采用酶聯免疫夾心兩步法和最后的熒光檢測（ELFA）相結合的分析原理。 固相管（SPR），既作為固相將抗 FbDP 單克隆抗體吸附在其表面，也作為移液裝置。分析試劑是即用 型，并分裝于密封的單次使用的試劑條中。 所有分析步驟都由儀器自動進行。反應介質在固相管中循環進出數次。 首先固相管吸取樣品、稀釋，然后在固相管中循環進出幾次。抗原與包被于固相管上的抗 FbDP 免疫 球蛋白相結合。未結合的成分在清洗步驟中去除。 在第二步中，包含一個堿性磷酸酶標記的抗 FbDP 單克隆抗體的共軛物與包被在固相管上的抗原相結 合，形成 “三明治"結構。未結合的成分在清洗步驟中去除。然后進行檢測。底物（磷酸 4-甲基傘形烷） 在固相管中循環進出幾次。共軛物酶催化底物水解為熒光產物（4-甲基傘形酮），其熒光強度可在 450 nm 處測量。熒光強度與樣品中的抗原濃度成正比。 IVD D-二聚體排除試驗試劑盒（酶聯免疫熒光法） 版本號 14219 E-CN-2015/01 2 實驗結束時，儀器會根據存儲于其中的校準曲線自動計算結果，然后打印一份報告。

【主要組成成份】 試劑盒組成（60 個測試）-試劑重組： 60個D-二聚體排除試驗試劑條 STR 即用型。 60（2x30）個D-二聚體排除試驗 固相管 SPR 即用型。 固相管內表面用抗FbDP單克隆免疫球蛋白（小鼠）包被。 D-二聚體排除試驗對照品： C1 對照品 2x2mL(凍干) C2 對照品 2x2mL(凍干) C1 C2 用2mL蒸餾水重懸。靜待5分鐘，然后混合。 重懸后，在2～8℃保存28天，或在-25±6℃保存至試劑盒的有 效期（重懸后立即凍結）。 反復凍融不可超過5次。 從用甘氨酸－小牛白蛋白緩沖液稀釋的人類血漿*中提取的 FbDP+防腐劑。 MLE數據標出了置信區間，單位mg/L（FEU）（“質控品C1濃度 范圍"或“質控品C2濃度范圍"）。 D-二聚體排除試驗校準品： S1 校準品： 2x2mL(凍干) S1 用2mL蒸餾水重懸。靜待5分鐘，然后混合。 重懸后，在2～8℃保存28天，或在-25±6℃保存至試劑盒的有 效期（重懸后立即凍結）。 反復凍融不可超過5次。 從用甘氨酸－小牛白蛋白緩沖液稀釋的人類血漿*中提取的 FbDP+防腐劑。 MLE數據標出了校準品濃度，單位mg/L（FEU）（“校準品S1濃 度范圍"），同時標出了以“相對熒光值"表示的置信區間（校 準品S1 RFV范圍）。 D-二聚體排除試驗稀釋液 1x5 mL(液體) R1 即用型。 Tris緩沖液（0.05mol/L、pH=7.4）、小牛血清、防腐劑。 校準測試所需的出廠主數據規格書： 試劑盒提供了 MLE 數據（主批次輸入） 或者 包裝盒標簽上印有MLE條形碼 *本品已經經過檢測顯示 HBs 抗原陰性，HIV1、HIV2 和 HCV 抗體陰性。不過，由于尚無一種試驗方法能夠*保證沒有這些 物質，所以本產品必須按照具有潛在的感染性進行處理。因此，處理當中應該采取常用的安全措施。 固相管（SPR） 生產過程中將固相管內表面用抗 FbDP 單克隆免疫球蛋白（小鼠）包被。每個固相管用 DEX2 代碼標識。 在開袋僅取出所需要的固相管后，小心將儲存袋密封好。 試劑條 試劑條包括 10 個孔，并覆蓋帶有標簽的金屬箔片。標簽包括一個條形碼，主要表示檢測代碼，試劑 盒的批號和有效日期。第一個孔的金屬箔片被打孔，以便加入標本。每個試劑條的最后一個孔都是一個熒 光讀數孔，可以在其中進行熒光測定。可以進行熒光閱讀。在試劑條的中間部分孔包含需要檢測的各種試 劑。 DEX2 試劑條的描述 孔 試劑 1 樣本孔。 D-二聚體排除試驗試劑盒（酶聯免疫熒光法） 版本號 14219 E-CN-2015/01 3 2、3、4 空白孔。 5 共軛物：TRIS緩沖液（0.05 mol/L，pH=6.5）中堿性磷酸酶標記的抗FbDP單克隆免疫球蛋白 （小鼠）、馬血清、防腐劑（400μL）。 6、7、9 清洗緩沖液：TRIS緩沖液（0.05 mol/L，pH=7.3）、化學穩定劑、防腐劑（600μL）。 8 稀釋液：TRIS緩沖液（0.05mol/L的，pH=7.4）、小牛血清、蛋白和化學穩定劑、防腐劑（600μL）。 10 含底物的熒光讀數孔：磷酸4-甲基傘形烷（0.6mmol/L）、二乙醇胺（DEA）（0.62 mol/L或6.6％） PH=9.2 ±1g/L的疊氮鈉（300μL）。 * *警示詞：危險 危害： H318：造成嚴重眼部刺激。 預防措施： P280：配戴防護手套/護目鏡/面罩。 P305+P351+P338：如入眼：用清水小心沖洗數分鐘。如果配戴隱形眼鏡并方便摘除，摘除隱形眼鏡后 繼續沖洗。 詳情參見“材料安全性數據表"。 必需但試劑盒中未提供的材料及耗材： 使用一次性吸頭的移液器，用來分配 2 至 200ml 的液體。 無粉末的一次性乳膠手套。 對于其他具體的材料和用品，請參照儀器操作手冊。 VIDAS 系列儀器。

【儲存條件及有效期】 2～8℃儲存，有效期 12 個月。 禁止冷凍試劑。 所有未用試劑存于 2～8℃。 打開試劑盒后，檢查固相管鋁箔袋密封是否完好且無損壞。否則請勿使用固相管。 為保持固相管穩定性，取出所需 SPR 后請將有干燥劑的袋重新仔細密封并將整個試劑盒放回 2～8℃ 按推薦的環境儲藏試劑盒,可確保所有成份在標注的效期內穩定。 生產日期：詳見外包盒標簽。 失效日期：詳見外包盒標簽。

【適用儀器】 VIDAS，miniVIDAS，VIDAS 3